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PCR基因检测实验室解决方案

PCR基因检测实验室解决方案

PCR是分子生物学研究和实验的常规方法,并没有严格的净化要求,但是为了避免各个试验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排式气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

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实验室设计案例

试剂贮存和准备区:

该实验区主要进行的操作作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

标本制备区:

dafa888该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为相对于临近区域为正压,以避免从邻近区域进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区域内不必要的走动。

扩增反应混合物配制和扩增区:

dafa888扩增反应混合物配制和扩增区:该区域主要进行的操作为NDA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可以在本区域内进行。在巢氏PCR测定中,通常在一、轮扩增后必须打开反应管。因此巢氏扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区域内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区域漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

扩增产物分析区:

dafa888该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。本区是比较主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于临近区域为负压,以避免扩增产物从本区域扩散至其它区域。

完备的实验室配套设施:

完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、生物安全柜、离心机、加样器等。


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